RRC ID 30424
著者 Toba G, Ohsako T, Miyata N, Ohtsuka T, Seong KH, Aigaki T.
タイトル The gene search system. A method for efficient detection and rapid molecular identification of genes in Drosophila melanogaster.
ジャーナル Genetics
Abstract We have constructed a P-element-based gene search vector for efficient detection of genes in Drosophila melanogaster. The vector contains two copies of the upstream activating sequence (UAS) enhancer adjacent to a core promoter, one copy near the terminal inverted repeats at each end of the vector, and oriented to direct transcription outward. Genes were detected on the basis of phenotypic changes caused by GAL4-dependent forced expression of vector-flanking DNA, and the transcripts were identified with reverse transcriptase PCR (RT-PCR) using the vector-specific primer and followed by direct sequencing. The system had a greater sensitivity than those already in use for gain-of-function screening: 64% of the vector insertion lines (394/613) showed phenotypes with forced expression of vector-flanking DNA, such as lethality or defects in adult structure. Molecular analysis of 170 randomly selected insertions with forced expression phenotypes revealed that 21% matched the sequences of cloned genes, and 18% matched reported expressed sequence tags (ESTs). Of the insertions in cloned genes, 83% were upstream of the protein-coding region. We discovered two new genes that showed sequence similarity to human genes, Ras-related protein 2 and microsomal glutathione S-transferase. The system can be useful as a tool for the functional mapping of the Drosophila genome.
巻・号 151(2)
ページ 725-37
公開日 1999-2-1
DOI 10.1093/genetics/151.2.725
PMID 9927464
PMC PMC1460511
MeSH Amino Acid Sequence Animals Drosophila melanogaster / genetics* Genes, Insect* Genetic Vectors Humans Molecular Sequence Data Polymerase Chain Reaction / methods Sequence Alignment Sequence Analysis, DNA / methods*
IF 4.015
引用数 196
WOS 分野 GENETICS & HEREDITY
リソース情報
ショウジョウバエ DGRC#200002 DGRC#200005 DGRC#200006 DGRC#200007 DGRC#200008 DGRC#200009 DGRC#200010 DGRC#200011 DGRC#200012 DGRC#200017 DGRC#200018 DGRC#200019 DGRC#200022 DGRC#200023 DGRC#200024 DGRC#200025 DGRC#200027 DGRC#200028 DGRC#200029 DGRC#200030 DGRC#200032 DGRC#200033 DGRC#200034 DGRC#200035 DGRC#200036 DGRC#200037 DGRC#200038 DGRC#200040 DGRC#200041 DGRC#200042 DGRC#200043 DGRC#200044 DGRC#200045 DGRC#200224 DGRC#200046 DGRC#200225 DGRC#200047 DGRC#200226 DGRC#200048 DGRC#200227 DGRC#200049 DGRC#200228 DGRC#200051 DGRC#200229 DGRC#200052 DGRC#200230 DGRC#200053 DGRC#200231 DGRC#200054 DGRC#200232 DGRC#200055 DGRC#200234 DGRC#200235 DGRC#200056 DGRC#200236 DGRC#200237 DGRC#200238 DGRC#200239 DGRC#200240 DGRC#200241 DGRC#200242 DGRC#200243 DGRC#200244 DGRC#200245 DGRC#200246 DGRC#200057 DGRC#200248 DGRC#200250 DGRC#200251 DGRC#200058 DGRC#200059 DGRC#200252 DGRC#200255 DGRC#200060 DGRC#200258 DGRC#200061 DGRC#200259 DGRC#200261 DGRC#200062 DGRC#200262 DGRC#200063 DGRC#200263 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